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《飼料中維生素A的測定 高效液相色譜法》征求意見

2023-10-18 09:57:23 來源:儀表網 閱讀量:8129

  近日,由中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所[國家飼料質量監督檢驗中心(北京)] 、山東省飼料質量檢驗所 、帝斯曼維生素(上海)有限公司 、四川威爾檢測技術股份有限公司等單位起草,TC76(全國飼料工業標準化技術委員會)歸口的國家標準計劃《飼料中維生素A的測定 高效液相色譜法》征求意見稿已編制完成,現公開征求意見。
 
  維生素是具有高度生物學活性的有機化合物,是維持動物正常生命和生長所必需的一類特殊的營養物質。維生素 A 有天然和人工合成兩類。天然的維生素 A 只存在于動物性食物中,主要存在于肝臟中,植物組織中尚未發現,人工合成的主要有維生素 A 乙酸酯、維生素 A 棕櫚酸酯。用作飼料添加劑的主要以合成維生素 A 產品為主。
 
  維生素 A 不溶于水而溶于油脂和乙醇等脂溶性溶劑。分子中含多個不飽和鍵,化學性質活潑,對空氣、熱、濕度和光敏感,在光和空氣中易被氧化而失去生理效能,為了增加維生素 A 的穩定性,維生素 A 除脂化、添加抗氧化劑外,目前常用的方法還有用穩定的物質明膠、淀粉進行包被。
 
  維生素 A 在維護動物視覺、維護黏膜的完整性、促進生長和生殖、影響造血機能、抗氧化、抑制腫瘤、維持正常的免疫功能等方面都起著極其重要的作用,是各種養殖動物必需添加的微量營養成分,因此添加劑預混合飼料中維生素 A 乙酸酯也常被列為國家監督抽查必檢項目。
 
  現行國標 GB/T 17817-2010 已頒布實施十幾年,原標準方法中皂化法檢測步驟多,時間長,多年來,制標單位一直致力于研發快速準確的檢測方法,固相萃取、在線固相萃取-二維液相色譜法與原皂化法比較,可節省大量化學試劑,縮短檢測時間,能夠滿足檢測方法允許誤差要求。
 
  本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
 
  本文件代替GB/T 17817-2010《飼料中維生素A的測定 高效液相色譜法》,與GB/T17817-2010相比,除結構調整和編輯性改動外,主要技術變化如下:
 
  a)皂化提取法范圍增加了精料補充料,直接提取法范圍增加復合預混合飼料。直接提取法更改了定量限(見第 1 章,2010 年版的第 1 章);
 
  b)皂化提取法提取劑更改為石油醚(沸程 30 ℃-60 ℃)(見第 4 章,2010 年版第 3 章);
 
  c)第一法中增加了維生素 A 標準系列溶液(見 4.2.19)
 
  d)第一法中配合飼料、精料補充料、濃縮飼料樣品制備方法更改為試樣全部通過 1 mm孔篩(見 4.4,2010 年版中 3.5);
 
  e)增加了離線固相萃取法(4.5.1.2.2)和在線固相萃取法(4.5.1.2.3)及其色譜圖;
 
  f)增加了液相色譜參考條件(見 4.5.2.2 和 4.5.2.3);
 
  g)增加了定性檢測方法,定量檢測增加多點校正(見第 4 章);
 
  h)更改了第一法中試驗數據處理(見 4.6,2010 年版的 3.6.2.3);
 
  i)刪除了正相色譜條件(2010 年版第 3 章);
 
  j)更改了直接提取法提取溫度,由 65 ℃改為室溫(見第 5 章,2010 年版第 4 章);
 
  k)增加了直接提取法中維生素 A 標準系列溶液(見 5.2.4)
 
  l)更改了直接提取法中試驗數據處理(見 5.6,)
 
  m)增加校正維生素 A 及維生素 A 乙酸酯標準儲備溶液濃度的方法(見附錄 A)。
 
  本文件描述了飼料中維生素A的高效液相色譜測定方法。
 
  本文件中“第一法 皂化提取法”適用于配合飼料、精料補充料、濃縮飼料、復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素 A 的測定;“第二法 直接提取法”適用于復合預混合飼料、維生素預混合飼料中維生素 A 乙酸酯的測定。
 
  本文件第一法定量限為 1000 IU/kg,第二法定量限為 20000 IU/kg。
 
  第一法 皂化提取法
 
  原理:
 
  試樣用堿溶液皂化后,經液液萃取或固相萃取凈化后,用高效液相色譜儀分離測定,外標法定量。
 
  儀器設備:
 
  1.高效液相色譜儀:配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
 
  2.紫外可見分光光度計:帶1cm 石英比色皿。
 
  3.分析天平:精度為0.001g、0.0001g和0.00001g。
 
  4.回流裝置:圓底燒瓶和冷凝管。
 
  5.恒溫水浴,控溫精度±2℃。
 
  6.旋轉蒸發儀。
 
  7.離心機:轉速不低于 10000 r/min。
 
  8.固相萃取裝置。
 
  9.氮吹儀。
 
  10.渦旋混合器。
 
  第二法 直接提取法
 
  原理:
 
  用甲醇溶液提取試樣中的維生素 A 乙酸酯,高效液相色譜儀測定,外標法定量。
 
  儀器設備:
 
  1.高效液相色譜儀:配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
 
  2.紫外-可見分光光度計:帶1cm石英比色皿。
 
  3.分析天平:精度為0.0001g和0.00001g。
 
  4.超聲波清洗器:頻率不低于35000Hz。
 
  更多詳情請見附件。

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